液氮罐中的菌種活化

點擊次數：2632 更新時間：2020-06-01

液氮罐中的菌種(Bacterial species)活化是怎么回事？
菌（fungus)種活化就是將保藏狀態的菌種放入適宜的培養基中培養，逐級擴大培養是為了得到純而壯的培養物，即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物。液氮罐一般可分為液氮貯存罐、液氮運輸罐兩種。貯存罐主要用于室內液氮的靜置貯存，不宜在工作狀態下作遠距離運輸使用；液氮運輸罐為了滿足運輸的條件，作了專門的防震設計。其除可靜置貯存外，還可在充裝液氮狀態下，作運輸使用，但也應避免劇烈的碰撞和震動。液氮罐使用過程中要經常檢查。可以用眼觀測也可以用手觸摸外殼，若發現外表掛霜，應停止使用；特別是頸管內壁附霜結冰時不宜用小刀去刮，以防頸管內壁受到破壞，造成真空不良，而是應將液氮取出，讓其自然融化。菌種發酵又稱酦酵有一般需要 2-3 代的復壯過程，因為保存時的條件往往和培養時的條件不相同，所以要活化,讓菌種逐漸適應培養環境(environment) 要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。自增壓液氮罐
目前(International)國內常用的菌種保存方法包括(bāo kuò)：定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍干燥法、 80℃ 冰箱凍結法、液氮超低溫凍結法。
對于不同的保存方式活化的方式也不同：
1 定期移植法的菌種復蘇較簡單，直接轉接即可;
2 液體石蠟法保存的菌種在復蘇時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上，生長繁殖（fán zhí）后，再重新轉接一次;
3 沙土管法保存菌種(Bacterial species)在復蘇時，在無菌(意思：沒有活菌)條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養(to c*te)基上，長出菌落后再轉接一次。或取沙土粒于適宜的液體(liquid)培養基中，增殖培養后再轉接斜面;
4 真空冷凍(freezing)干燥法保存菌種在復蘇時先用 70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱，用無菌(意思：沒有活菌)棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養液溶解菌塊，使用(use)無菌吸管移入新鮮培養基上，進行適溫培養;
5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種(Bacterial species)復蘇時，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置 38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止，約需 50 秒-100 秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將網站內容物移**適宜的培養基上進行培養 6 液氮超低溫凍結法保存菌種復蘇與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇相似，從液氮罐(Liquid)中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置在 38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止，一般約需 50 秒-100 秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移**適宜的培養基上進行培養。
總結一下菌種活化需要以下幾個步驟（procedure)：
**配置菌（fungus)種適宜生長(Grow)的培養基
第二將菌（fungus)種從保藏狀態恢復到室溫狀態，比如將冷凍(freezing)的菌種解凍第三將通過操作將保藏的菌種接種到培養基中培養，此步驟稱為菌種復壯
第四步挑選培養基茁壯的菌落，挑選其中部分菌落接種到新的培養基中培養，重復此步驟（procedure) 2-3 次，從而得到生長(Grow)良好的菌落
經過這四個步驟就到達將菌種從保藏狀態活化的目的
有同學已經說的很專業(zhuān yè)了，我就給你說些簡單實用的。不知道你出于何種目的要進行活化。如果你是用凍存管保存的菌株進行活化，取出 2 顆小珠放在適宜的固體培養(to c*te)基上，合上蓋讓小珠在平皿上滾動，適宜條件培養就可以了。長出一個菌落，你再繁殖就可以了。如果你是凍干粉的菌種(Bacterial species)，準備適宜的液體培養基，少少一點點粉末接種就可以了，根據此菌種一般液體培養所需時間，大概在 36-48h，你還可以在觀察(Observed)到液體渾濁、試管底部有沉淀（precipitation）時(沉淀者也可能為原本死亡的細菌)，取 100 微升液體涂抹(smear)在固體培養基上。一般的話，復蘇的菌種需要重復幾次復壯。自增壓液氮罐