細胞在MVE液氮罐保存方法及步驟

點擊次數：2705 更新時間：2019-06-13

MVE液氮罐也被眾多領域所應用，不管是生活中還是生產中都能看到它的身影，如醫療行業，生物醫學行業，金屬生產行業以及精密儀器等。今天為大家介紹的是細胞在液氮罐保存方法及步驟

一、MVE液氮罐的應用范圍及用途

1.在生物醫學行業中的應用：目前主要是用于牛、羊等優良種公畜以及珍惜動物的精液保存，以及遠距離的運輸和醫學中的疫苗、菌毒種、細胞以及人、動物的器官等浸泡于成都金鳳液氮罐儲存的液氮中，長期活性保存。

2.在金屬生產行業中的應用：利用成都金鳳液氮罐中儲存的液氮對金屬材料進行深冷處理，可以改變金屬材料的金相組織，顯著提高金屬材料的硬度、強度和耐磨性能。

精密儀器電子行業中的應用：將精密零件經過液氮深冷處理后進行裝配，提高零件裝配質量，從而提高設備或儀器的整機性能。

3.醫療衛生行業的應用：用液氮容器內儲存的液氮作為制冷劑進行手術，治療或冷藏冷凍細胞、組織等。冷療儀用于醫院臨床各科室能夠代替手術，安全無毒，無害痛苦少，不損害健康組織，殺菌效果良好。

4.美容領域的應用：主要用液氮的超低溫來處理皮膚表層。如采用手術治療，疤痕往往是不可避免的后遺性缺陷，而冷凍治療卻不會出現這些情況，而且效果也比較理想。

二、細胞在液氮罐保存步驟：

怎么在液氮罐里儲存細胞呢?一般來講，凍存細胞的步驟會影響到細胞復蘇時的活力，所以在使用液氮罐儲存細胞時應小心并按步驟操作：

1、預先配制凍存液：10 % DMSO + 90%胎牛血清，4℃冰箱保存預冷;

2、用胰酶對細胞進行消化：倒去培養瓶中的培養基或用槍小心吸去培養板中的培養基，PBS沖洗兩次，用胰酶消化細胞(盡可能溫和);

3、再次用*培養液懸浮細胞，將預冷的凍存液加入消化*的細胞中，用滴管輕輕吹打混勻。

4、在每支凍存管中加入1ml細胞液，密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期。

5、凍存步驟的細致直接關系到細胞復蘇時的活力，如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜，放入液氮罐;或者可以在4℃，2h;

三、細胞在MVE液氮罐的儲存分為兩種：

液氮罐里一般灌有低溫液氮，細胞的儲存需要低溫環境，放入-196度的液氮里對細胞是長期保存的一個適合的環境。常規液氮罐是將細胞存入液氮罐的液相里儲存，有的方形抽屜式提籃，2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里，*浸入。使細胞*處于液氮-196度環境下，才能夠長期保存細胞。