液氮速凍處理對樣本保存的影響

點擊次數：4066 更新時間：2017-06-21

1.液氮速凍處理對樣本保存的影響液氮速凍處理的10頭亞洲小車蝗樣本在12h內均無存活跡象。說明通過液氮速凍處理能夠使亞洲小車蝗活體樣本迅速死亡，從而消除因逆境脅迫造成的樣本本身生理生化變化，避免了這些變化對蝗蟲樣本基因組DNA提取產生可能的不利影響。

2.不同保存方法對基因組 DNA提取影響亞洲小車蝗經基因組DNA提取后，用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測結果見圖1～3。由圖可見，液氮速凍后保存和無水乙醇保存的樣本提取的基因組DNA電泳條帶清晰、無拖尾且亮度高，說明得到的DNA濃度較大；直接冷凍保存的樣本提取的DNA電泳檢測結果顯示條帶整齊、無拖尾，但是亮度較低，說明得到的DNA濃度較小；蝗蟲干標本提取的基因組DNA電泳檢測顯示條帶不清楚，并有明顯拖尾現象，有的甚至看不到條帶，說明干制標本保存會導致蝗蟲基因組DNA發生嚴重降解，會對下一步基因擴增、分子標記等分子生物學試驗的進行造成不利的影響。

3.冷凍脅迫對基因組DNA提取影響對比液氮速凍后保存和直接冷凍保存兩種樣本保存方法對蝗蟲基因組DNA提取結果可以看出，液氮速凍后保存的樣本提取的基因組DNA明顯比直接冷凍保存的樣本基因組DNA的電泳條帶亮度高，說明液氮速凍后保存得到的DNA的濃度較大。由此得出，樣本在受到冷凍脅迫死亡的過程中會發生基因組DNA降解現象，使提取得到的DNA 的濃度較小。所以，液氮速凍后保存更適合昆蟲基因組學的研究。